Bakteri Kültürü Hazırlama ve Bakteri Yetiştirme Deneyi

Bakteri üreteceğimiz bu deneyde, bakterilerin üreyeceği besi yerine ihtiyaç duyarız. Peki besi yeri nedir?

Besiyerleri mikroorganizmaların geliştirilmesi için formülize edilmiş ortamlardır. Bunlar, mikroorganizmaların geliştirilmesi, izolasyon, identifikasyon, sayım, duyarlılık testleri, sterilite testleri, klinik örneklerin incelenmesi, gıda, su ve çevre kontrolleri, biyolojik ürünlerin elde edilmesi, antibiyotik ve vitamin analizleri, endüstriyel analizler vb. gibi çok farklı amaçlara yönelik olabilir.

Besiyerleri çok farklı şekillerde hazırlanabilir ve kullanılabilir. Örneğin, süt bir "genel besiyeri" olup, mikroorganizmaların gelişmeleri için gerekli bütün besin maddelerini ve bunların kullanılabilmesi için yeterli suyu içerir. Üzüm suyunda da gelişme için gereken besin maddeleri ve su bulunmasına karşın, yüksek asitliği nedeni ile sadece bu asitlikte gelişebilecek olan mikroorganizmaların (bazı bakteriler ve özellikle mayaların) gelişimine uygundur.

Kavramlar

·         Besiyeri

·         Bakteri

·         Mikrobiyoloji

Arka Plan

Deneyde amaç öğrencilere gözle görülmeyen bakteri ve mikropların aslında hayatımızda ne denli yer kapladığını göstermektir.

Malzemeler

Petri Kabı 6 Adet                                                     Pamuklu Çubuk, 6 Adet

Beher 600ml                                                            Etiket

Agar, 5gr

Gereken Malzemeler

İspirto Ocağı, Ocak yada Mikrodalga Fırın                                          

Güvenlik Önlemleri

Tüm kimyasalların gözler ve cilt ile temasından sakının. Laboratuvar koruyucu gözlüğü takın.  Kimyasallara dayanıklı önlük ve eldiven kullanın.

 

 

 

Deneyin Yapılışı

1.    600ml beher içerisine 50-60 °C de su koyun. Agar tozunu beher içerisine atın ve iyice karıştırın. Bu karışımı iyice çözmek için yaklaşık 3 dakika kaynatın.

(Tam kaynama noktasına geldiğinde fokurdamadan ateşin üzerinden alın. Eğer karışımı tam fokurdayarak kaynatırsanız içerisinde yüzen parçacıklar oluşacaktır. Karışım berrak olmalıdır ve bunun için tam kaynama anında karışım köpürmeden ateşten alınmalıdır)

İyi bir karışım oranı:

• ½ çay kaşığı agar (yaklaşık 1.2 gram)

• ¼ su bardağı (60 mL) sıcak su

2.    Karışımı ateşten aldıktan sonra 3-5 dakika soğumasını bekleyin. Daha sonra petri kaplarının alt yarısına kadar sıcak besin agarı dökün ve kapaklarını kapayın.

3.    Petri kapaklarını biraz aralık bırakarak kapatın böylece fazla buharlaşma yapmasını engellersiniz.

4.    Bu haliyle 1 saat soğumaya bırakın.

5.    Pamuklu çubukları bakteri örneği almak için kullanın. Tv kumandası, cep telefonu, kapı kulpu vb. insan elinin çokça değdiği noktalara pamuklu çubuklarınızı gezdirin.

6.    Her bir örnek için temiz pamuklu çubuk kullanmanız gerektiğini unutmayın.

7.    İyi bir numune almak için pamuğu su ile hafifçe nemlendirin ve numune almak istediğin yüzeye bolca sürtün.

8.    Petri kabının kapağını kaldırın ve numune aldığınız pamuklu çubuğun ucuyla agarın yüzeyine z harfi çizerek ekim yapın.

9.    Ekim yaptığınız petri kabı üzerine etiket vurarak tarih ve numuneyi aldığınız yeri not alın.

10.  Ekim yaptığınız petri kaplarını ortalama 37 ° C sıcaklıkta ve karanlık bir yerde tutun. Bunun için bir koli kullanabilirsiniz. Önümüzde ki birkaç gün içerisinde petri kaplarında bakteri, mantar kolonilerinin ortaya çıktığını gözlemleyebilirsiniz.

Atık Malzemelerin İmhası

Çevrenizde toplanan çoğu bakteri zararlı değildir. Bununla birlikte, bir Petri kabı içinde milyonlarca kolona çarpıştıklarında, bir tehlike haline gelirler. Açık kesiklerin lastik eldivenlerle korunduğundan ve büyümekte olan bakterileri hiç içmediğinizden veya nefes aldığınızdan emin olun. Petri kaplarınızı, deneyin tamamı için fermuar kilitli torbalarla kapatın. Deney bittiğinde, bazı insanlar Petri bulaşık torbasını, birkaç damla ağartıcı ile birlikte daha büyük bir fermuarlı kilit torbasına yerleştirmenizi önerir. Büyük torbayı kapatın ve çöp kutusuna atın.

İpuçları

·         Agarlı petri kaplarında oluşan nem ekim için problem oluşturacaktır. Bunun için agarlı petri kaplarını soğuturken nemi kaplarda hafif açıklık bırakarak önleyebilirsiniz.

·         Ekimden sonrada oluşabilecek neme karşı önlem almalısınız çünkü üreteceğiniz bakteriler nemi sevmiyor olabilir.

·         Numune aldığınız yüzeyleri bir dezenfektan ile temizledikten sonra aynı deneyi yapınız. Sonuçları gözlemleyiniz.

·         Plakadaki kolonilerin sayısını sayın, renk, şekil ve diğer özelliklerin farklarını not edin.

·         Bakterilerin büyümesi biraz zor olabilir, bu nedenle birden fazla deneme yapmak zorunda kaldıysanız cesareti kırmayın. Onların da büyümesi için yeterli zaman tanıyın.